Quins són els mètodes per detectar clenbuterol?

El clenbuterol es va utilitzar originalment per tractar l'asma bronquial, però els seus efectes secundaris sobre el cos humà són tan greus que fa temps que està prohibit a tot el món. No obstant això, molts comerciants de carn l'utilitzen en pinsos per reduir costos Si els humans consumeixen carn amb aquest residu durant molt de temps, provocarà efectes adversos en el sistema cardiovascular.

D'aquesta manera indueix tumors malignes. Per tant, la detecció de clenbuterol en productes carnis s'ha de controlar des de la font. Actualment, hi ha diversos mètodes de detecció:

Cromatografia de gasos-espectrometria de masses (GC-MS)

L'avantatge del mètode GC-MS és que combina l'efecte de separació eficient i ràpid de la cromatografia amb l'anàlisi qualitativa altament sensible de l'espectrometria de masses. Pot realitzar anàlisis qualitatives i quantitatives sobre un residu específic quan existeixen múltiples residus al mateix temps i té un límit de detecció més elevat. Fente C. A et al. van utilitzar GC-MS per detectar els residus de CLB en el pèl del bestiar, amb un límit de detecció mínim de 5 ng/g, Pteer Batioens va utilitzar la cromatografia de gas-espectrometria de massa (GC-MS-MS) per detectar el contingut de CLB en teixits de bovins, ovells i porcs, amb un límit de detecció de GC/g; per detectar CLB a l'orina de porc, amb un límit de detecció de 0,5 ng/mL Van Rhijin et al van utilitzar derivats de trimetilsilil o 2-dimetilsililmorfolina per detectar CLB en extractes d'orina. A més, en comparació amb el mètode HPLC, el mètode GC-MS té una sensibilitat de detecció més alta i una taxa de falsos positius més baixa. Per tant, el meu país ha establert legalment el GC-MS com a mètode de confirmació per detectar CLB (NY/T468~2001).

Cromatografia líquida d'alt rendiment (HPLC)

L'HPLC és adequada per a la determinació d'agonistes β tèrmicament inestables i altament polars i els seus metabòlits. A més, l'HPLC es pot combinar amb sistemes d'extracció, purificació, derivatització de fluorescència post-columna i espectrometria de masses (MS) per automatitzar fàcilment el procés d'anàlisi. Huang Shixin et al. (1995) van utilitzar un detector d'ultraviolats per detectar residus de CLB en fetge de porc i carn de porc a λ = 243 nm, columna cromatogràfica: shimpack CLC-ODS150 × 6,0 mn, cabal: 1 ml/min, temperatura de columna: temperatura ambient 30 ℃ límit de detecció i pot arribar al límit de detecció mínim. Algunes persones a l'estranger van utilitzar HPLC (detector de matriu de díodes) per determinar residus de CLB en aliments d'origen animal, i el límit mínim de detecció era d'1,26 ng/g, amb una taxa de recuperació del 98,9%. Actualment, el meu país ha utilitzat HPLC com a mètode semi-confirmatori per detectar residus de CLB, amb un límit de detecció mínim que va d'1 a 15 ng/g.

Assaig immunoabsorbent lligat a enzims (ELISA)

Mitjançant l'ús de la unió específica d'antígens i anticossos immunològics i l'efecte catalític eficient dels enzims, la peroxidasa de rave picant (HRP) es combina amb clenbuterol (CL) mitjançant un mètode químic per formar clenbuterol conjugat amb enzims. L'anticòs (anticòs IgG anti-conill d'ovella) recobert al transportador en fase sòlida es combina amb l'anticòs específic anti-clenbuterol, i després s'afegeix el clenbuterol a provar i el clenbuterol acoblat a l'enzim. S'uneixen de manera competitiva a l'anticòs de clenbuterol. Si hi ha més clenbuterol per provar, hi haurà menys clenbuterol acoblat amb enzims i la quantitat de substància de color serà menor. El contingut de clenbuterol a la mostra es va determinar mitjançant inspecció visual o colorimetria. La longitud d'ona òptima per a la colorimetria era de 450 nm i la longitud d'ona de referència hauria de ser superior a 600 nm.

Immunocromatografia d'or coloidal

Utilitzant la tecnologia d'immunocromatografia d'or col·loïdal competitiva, Clen a la solució de prova es combina amb l'anticòs marcat amb or del coixinet marcat amb or per formar un complex. Si la concentració de Clen a la solució de prova és inferior al valor de sensibilitat, l'anticòs marcat amb or no lligat flueix a la zona T i s'uneix al conjugat Clen-BSA a la concentració de la membrana, si es fixa gradualment en una concentració de T més sensible valor, tots els anticossos marcats amb or formen un complex i ja no es combinaran amb el conjugat Clen-BSA a la línia T per formar una línia T visible. El complex no fixat flueix per la zona T i és capturat per l'anticòs secundari a la zona C, formant una línia C visible. L'aparició de la línia C indica que s'ha produït una immunocromatografia, la qual cosa significa que el paper de prova és efectiu.

Mètode de prova de plegat

1. Llegiu completament el manual d'instruccions abans de provar i torneu la placa de reactiu i la solució de mostra a temperatura ambient abans d'utilitzar-la.

2. Obriu la bossa d'alumini i plàstic i traieu el paper de prova.

3. Operar segons el model (l'orina no ha de remullar directament la zona d'observació).

3.1 Submergiu l'extrem blanc del paper de prova a l'orina (el nivell del líquid no ha de superar la línia horitzontal) i mantingueu-lo durant 5 segons;

3.2 Utilitzeu un comptagotes per absorbir la mostra d'orina que es vol analitzar i afegiu lentament 3 gotes de mostra al pou de mostra.

4. Col·loqueu la tira reactiva plana durant 1 minut i espereu que aparegui la tira vermella.

5. Llegeix el resultat entre 3 i 8 minuts. El resultat no serà vàlid després de 10 minuts.

6. Els resultats es poden obtenir en 10 minuts

Interpretació de resultats plegables

Positiu (+): només apareix una banda vermella porpra a l'àrea de control de qualitat (C). No van aparèixer bandes vermelles porpra a l'àrea de prova (T).

Negatiu (-): apareixen dues bandes vermelles porpra. Un es troba a l'àrea de prova (T) i l'altre es troba a l'àrea de control de qualitat (C).

No vàlid: no apareix cap banda vermella i violeta a l'àrea de control de qualitat (C), que indica que la prova ha fallat o que el paper de prova ha caducat.

Nota: La tira vermella-morada de l'àrea de prova (T) pot mostrar diferents tons de color. Tanmateix, dins del temps d'observació prescrit, independentment de la profunditat de color de la banda, fins i tot una banda molt feble s'hauria de jutjar com a resultat negatiu.

Notes plegables

1. Si us plau, utilitzeu la targeta de prova una vegada durant la vida útil.

2. Eviteu la llum solar directa i els ventiladors elèctrics durant les proves.

3. Intenteu no tocar la superfície de la pel·lícula blanca al centre de la targeta de prova.

4. Els comptagotes de mostres d'orina no s'han de barrejar per evitar la contaminació creuada.

5. Si hi ha precipitació o terbolesa a la mostra d'orina, centrifugueu-la abans de fer la prova.

Cromatografia líquida-espectrometria de masses/espectrometria de masses (HPLC-MS/MS)

Veure SN/T

1924-2007 Mètode de detecció de residus de clenbuterol, ractopamina, salbutamol i terbutalina en aliments d'origen animal d'importació i exportació.

Aquesta norma s'aplica a la detecció de residus de clenbuterol, ractopamina, salbutamol i terbutalina en músculs i vísceres d'aliments d'origen animal.

Els residus de fàrmacs de la mostra es van extreure amb tampó d'acetat d'amoni a pH 5,2 i es va afegir β-glucuronidasa-aril tioesterasa per a la hidròlisi enzimàtica.