Què són les cèl·lules epitelials?

Hi ha moltes cèl·lules en el cos humà i les diferents cèl·lules tenen diferents funcions, per tant, quan hi ha un problema amb les cèl·lules humanes, sabem quin tipus de dany causarà a la salut humana, i el nombre de cèl·lules epitelials també és diferent.

Moltes persones no saben què són les cèl·lules epitelials baixes. Podeu obtenir una consulta detallada sobre aquests temes perquè, quan cultiveu cèl·lules epitelials, sabreu quin mètode és el millor per triar sense perjudicar la vostra salut.

Què són les cèl·lules epitelials?

Cultiu de cèl·lules epitelials

1) Cultiu de cèl·lules epidèrmiques

1. Recollida de material: Agafeu petits trossos d'empelts de pell quirúrgica o pell residual de la cirurgia, preferiblement amb una fina capa queratinitzada, i la pell dels nadons prematurs avortats és encara millor, i talleu-les en trossos petits de 0,5 a 1 centímetre quadrat.

2. Tractament amb EDTA: primer lloc en EDTA al 0,02% a temperatura ambient durant 5 minuts.

3. Digestió en fred: Substituïu per tripsina al 0,25% i s'incube a 4°C durant la nit.

4. Separació: Traieu la pell i feu servir pinces o pinces per separar l'epidermis i la dermis.

5. Digestió calenta: Traieu l'epidermis i processeu-la per separat. Talleu-la a trossos més petits amb unes tisores, poseu-la en tripsina nova al 0,25% i digeriu-la a 37 ℃ durant 30 o 60 minuts més.

6. Utilitzeu una pipeta per bufar amunt i avall suaument per fer una suspensió cel·lular.

7. Medi de cultiu: Després de filtrar a través d'una malla d'acer inoxidable de 80 malles, centrifugar a baixa velocitat, aspirar el sobrenedant, afegir directament la solució Eagle i sèrum de vedella al 20% per fer una suspensió cel·lular, inocular en un plat i cultivar en una incubadora de CO2.

2) Cultiu de teixit mamari

Mètode de cultiu directe: (apte per al cultiu de teixits tous amb poca fibra)

1. En un recipient que contingui una petita quantitat de medi de cultiu o solució de Hanks, utilitzeu una fulla afilada per tallar el teixit en trossos repetidament.

2. Injecteu els fragments de teixit i el líquid en un tub de centrífuga, afegiu-hi una petita quantitat de medi de cultiu, bufeu amb una pipeta una estona i col·loqueu-lo en una reixeta de tubs d'assaig durant 3 o 5 minuts. Aspirar el líquid sobrenedant pot eliminar parts de cèl·lules no mamàries. Repetiu de 2 a 3 vegades.

3. Després de l'últim tractament, afegiu més medi de cultiu al tub de sedimentació i bufeu lleugerament amb una pipeta per tornar a suspendre el sediment. Sense esperar que els grups de cèl·lules caiguin, filtreu a través de 3 o 4 capes de gasa estèril en un altre tub.

4. Ajustar la densitat adequada i inocular en ampolles de cultiu per al cultiu.

Mètode de digestió de col·lagenasa: (adequat per processar teixits més durs que contenen més fibres)

El procés és el mateix que cultivar altres teixits.

3) Cultiu de cèl·lules epitelials gàstriques

1. Mostra: Prendre una petita quantitat de mucosa de la zona no lesionada a l'extrem distal de la mostra gàstrica extreta durant una úlcera gàstrica o una cirurgia de càncer gàstric.

2. Neteja: Després d'esbandir amb una solució que contingui gentamicina (400 μg/ml) i amfotericina (2 μg/ml a Hanks), esborrar la mucosa inferior amb un instrument rom i tallar-les en mides d'1 mm3.

3. Digestió: Digerir en col·lagenasa tipus I i hialuronidasa a 37°C durant 80 minuts.

4. Centrifugació: Recollir la suspensió cel·lular, centrifugar a 800 rpm i esbandir dues vegades amb solució de Hanks.

5. Inoculació: Després de l'última centrifugació, s'afegeix el medi de cultiu complet que conté de l'1% al 2% de sèrum fetal boví i inoculeu en plaques de cultiu amb diferents nombres de pous. La quantitat d'inoculació depèn de la finalitat de l'experiment.

4) Cultiu d'hepatòcits

Cultiu de blocs de teixit primari: agafeu un fetge fresc, primer traieu els components fibrosos com la membrana i els vasos sanguinis, utilitzeu un ganivet o unes tisores per tallar el fetge en trossos petits d'aproximadament 1 mm3 i utilitzeu el mètode de cultiu fixat a la paret.

5) Cultiu de cèl·lules endotelials

1. Agafeu el cordó umbilical fresc després del part. Si no es cultiva immediatament, es pot emmagatzemar a 4 °C, però no més de 12 hores. Talleu asèpticament en seccions de 10-15 cm de llarg. Altres, com els grans vasos sanguinis d'embrions i animals joves, també es poden utilitzar per al cultiu.

2. Primer utilitzeu una xeringa de tres vies per absorbir la solució de PBS tèbia i injecteu-la a la vena del cordó umbilical per rentar la sang residual.

3. Fixeu un extrem del cordó umbilical amb una pinça vascular i injecteu lentament col·lagenasa amb una concentració final del 0,1% a la vena umbilical des de l'altre extrem, lligueu-lo per omplir els vasos sanguinis per evitar el reflux de líquid durant 10 minuts.

4. Aspireu el líquid de digestió que conté cèl·lules endotelials i injecteu-lo en un tub de centrífuga. Per obtenir més cèl·lules, injecteu PBS calent per esbandir 2 o 3 vegades per eliminar completament les cèl·lules restants i injecteu-les al tub de centrífuga per a la centrifugació.

5. Aspirar el sobrenedant, afegir 1640 medi de cultiu per fer una suspensió cel·lular, inocular en matràs i cultivar si tot va bé, les cèl·lules poden créixer en una monocapa en 2 o 3 dies.

A través de la introducció anterior, tenim una introducció a què són les cèl·lules epitelials i quins són els mètodes de cultiu de les cèl·lules epitelials. No obstant això, a l'hora de cultivar-les, no ho heu de triar segons les vostres pròpies necessitats.